МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

методы исследования, применяемые для анализа, установления структуры и количественного определения биологически активных соединений являются обычными химическими, физическими или физико-химическими методами. Специфика состоит только в том, что эти обычные методы применяются для анализа определенных объектов, таких, что требования к результатам анализа могут отличаться (и часто действительно отличаются) от методов, применяемых в других случаях. В частности, это относится к исследованию и анализу соединений, являющихся лекарственными средствами – как субстанций, так и входящих в лекарственную форму.

Методы исследования биологически активных соединений можно условно разделить на три группы: химические методы, физические методы и физико-химические методы. Это деление во многих случаях является условным, потому что очень часто использование одного метода приводит к изменениям характеристик, определяемых другим методом. Например, проведение химических реакций часто сопровождается изменением окраски или выпадением осадка, что является изменением характеристик физического состояния анализируемой системы.

Для установления структуры и анализа биологически активных соединений, в основном, используются физико-химические методы, рассмотрением которых мы и займемся.

 

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

 

К физико-химическим методам можно отнести следующие методы:

1.   Оптические методы:

Электронная спектроскопия (спектроскопия в УФ и видимой областях спектра).

Спектрофлуориметрия.

Колебательная спектроскопия: ИК-спектроскопия и спектроскопия комбинационного рассеяния.

поляриметрия, в том числе оптический круговой дихроизм и  дисперсия оптического вращения.

рефрактометрия.

2.   Масс-спектрометрия.

3.   Спектрометрия ядерного магнитного резонанса.

4.   Хроматография :

планарная – хроматография на бумаге, тонкослойная (ТСХ).

газовая (ГХ) и газо-жидкостная (ГЖХ) .

высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).

Применение физико-химических методов основано на использования соответствующего оборудования, с помощью которого исследователь получает искомую информацию. Эта информация всегда получается в результате обработки сигналов.

ОБРАБОТКА СИГНАЛОВ

 

Сигналом называются первичные данные, получаемые в ходе анализа. Это могут быть спектры, хроматограммы, какие-либо временные зависимости, например, зависимости от времени рН или оптической плотности и многое другое. Подобные данные представляют собой зависимости некоторой величины от времени, длины волны, расстояния (для данных по пространственному распределению) или иного параметра. Они включают в себя не только полезную, но и ненужную, мешающую информацию.

Аналитический сигнал, получаемый от любого прибора, всегда включает в себя полезную информацию, шум и сигнал фона. Составляющая, несущая полезную информацию, часто может быть представлена графически в форме пика. при этом, в зависимости от частоты составляющие суммарного сигнала могут быть разделены следующим образом (F 1).

Таблица 1.

ЧАСТОТА

КОМПОНЕНТА СИГНАЛА

Промежуточная

Полезная информация (пик)

Низкая

Фон, дрейф базовой линии

Высокая

ШУМ

Это легко видеть, например, на хроматограмме (F 2), где имеются как пики отдельных веществ (их площади связаны с содержаниями), так и участки базовой линии (прямой или искривленной) между ними. ............