Критерии оценки состояния вагинального микроценоза (исследование влагалищного содержимого на степень чистоты):

1.исключение ИППП

2.микроскопия вагинального мазка, окрашенного по Граму

3.посев вагинального отделяемого на факультативно – аэробную группу микроорганизмов и микроаэрофилы.

Окрашивание гинекологических мазков по модифицированному способу Грама (в соответствии с приказом №936 от 12.07.85 МЗ СССР).

Принцип: при обесцвечивании грамотрицательных микроорганизмов определенное время в этиловом спирте, отдают основной фиолетовый краситель и докрашиваются дополнительным оранжево – красным.

Реактивы:

1. 1% водный раствор кристаллвиолета: 1 г кристаллвиолета растворить в 100 мл кипящей дистиллированной воды, раствор фильтровать в горячем виде через бумажный фильтр.

2. водный раствор Люголя: 2 г йодистого калия растворить в 300 мл дистиллированной воды, в полученном растворе растворить 1 г чистого йода, фильтровать через бумажный фильтр

3. 96% этанол

4. 1% водный раствор нейтрального красного: 1 г нейтрального красного растворить в 100 млдистиллированной воды и фильтровать через бумажный фильтр.

Оборудование:

1.микроскоп

2.часы

3.штатив

Ход окраски:

1.фиксируют препарат 96% этанолом до высыхания

1.препарат покрыть полоской фильтровальной бумаги и заливают 1% водным раствором кристаллвиолета на1мин

2.через минуту снять фильтровашку, промыть препарат водопроводной водой и залить раствором Люголя на 10 сек до почернения мазка

3.смытьостаток люголевского раствора

4.обесцветитьпрепарат в 96% этаноле под контролем глаза поочередно погружая и вынимая препарат из спирта, находящегося в стаканчике. Обесцвечивают до прекращения стекания фиолетовых струек с тонких участков препарата.

5.промыть водопроводной водой

6.докрасить 1% раствором нейтрального красного в течение 3 минут

7.тщательно промыть под водопроводной водой, высушить и микроскопировать.

При правильной окраске препарат оранжево – красного цвета на тонких участках и лилово – фиолетового на толстых.Ядра клеток должны частично удерживать фиолетовую окраску, по периферии – оранжево – красный.

Преимущества метода:

1.быстрота установления диагноза (гонорея)

2.относительная простата установки

3.дешивизна

Недостатки метода:

1.субъективизм (опыт и квалификация лаборанта)

2.критичность взятия материала и приготовления мазков.

При микроскопии вагинального мазка, окрашенного по Граму оценивают:

1.состояние вагинального эпителия

2.лейкоцитарную реакцию

3.состав микрофлоры

При количественной характеристике микрофлоры используют критерии R.P. Nugent et al. Оценка общей микробной обсемененности вагинального отделяемого проводится по четырех балльной системе – по числу микробных клеток, обнаруживаемых в одном поле зрения при микроскопии с иммерсией:

+ до 10 микробных клеток в поле зрения, незначительное их количество (скудный рост)

++ от 11 до 100 – умеренное их количество

+++ от100 до 1000 – большое их количество

++++ более 1000 – массивное их количество

качественная оценка микрофлоры включает дифференциацию всех морфотипов по их тинкториальным и морфологическим признакам. Различают морфотипы лактобацилл, фузобактерий, бактероидов, мобилинкусов, лептотрихий, гарднереллы, также грамположительных кокков, дрожжеподобных грибов. ............