Хроматография: сущность, классификация, основные характеристики элюентной колоночной хроматографии
Хроматография - это метод разделения и анализа смесей веществ, основанный на различном распределении компонентов смеси между двумя несмешивающимися фазами - одна из которых должна быть подвижной, а другая неподвижной (ПФ, НФ). Смесь внедряется в ПФ при контакте с поверхностью НФ компоненты смеси распределяются между ПФ и НФ в соответствии с их свойствами (адсорбируемостью, растворимостью и др.) Устанавливается динамическое равновесие, вследствие чего молекулы разделяемой смеси часть времени находятся в НФ, а часть - в ПФ. Вдоль хроматографической системы движутся только те молекулы, которые находятся в ПФ. Разные вещества обладают различным сродством к ПФ и НФ. Вещество, сильнее взаимодействующее с НФ, будет медленнее двигаться через хроматографическую систему по сравнению с веществом, слабее взаимодействующим с НФ. Для разделения разных молекул НФ должна обладать хотя бы одним из их основных свойств:
1) физически сорбировать вещества, находящиеся в ПФ;
2) химически сорбировать вещества, находящиеся в ПФ;
3) растворять разделяемые вещества;
4) иметь пористую структуру и поэтому удерживать одни вещества и не задерживать другие, в зависимости от их размеров или формы.
Хроматографический метод является универсальным для разделения и анализа смесей веществ самой различной природы. В зависимости от конкретных задач он видоизменялся, вследствие чего возникло много вариантов метода (см. табл. 1).
В настоящее время хроматографические методы классифицируют по следующим признакам:
1) агрегатному состоянию ПФ и НФ;
2) механизму взаимодействия веществ, анализируемой смеси и сорбента;
3) природе явлений, лежащих в процессе разделения;
4) способу оформления метода;
5) методу проведения анализа.
По агрегатному состоянию ПФ может быть жидкой (жидкостная хроматография) или газообразной (газовая хроматография).
НФ может быть твердым телом или жидкостью, нанесенной на материал-носитель. В соответствии с этим в жидкостной хроматографии различают жидкость-жидкостную хроматографию (НФ и ПФ - жидкие) и жидкотвердофазную (ПФ - жидкая, а НФ - твердая), а в газовой хроматографии газотвердофазную (ПФ-газ, НФ-твердая) и газожидкостную (ПФ-газ, НФ-жидкость).
Таблица 1.
Вид Агрегатное состояние Способ Механизм ПФ НФ оформления разделения Газовая: газоадсорбционная Газ Твёрдая Колонна Адсорбционный газожидкостная Газ Жидкая Колонна Распределительный Жидкостная: жидко-твердофазная Жидкость Твёрдая Колонна Адсорбционный жидко-жидкостная Жидкость Жидкость Колонна Распределительный Ионообменная Жидкость Твёрдая Колонна Ионный обмен Тонкослойная Жидкость Жидкость Тонкий слой Распредели-тельный Жидкость Твёрдая Тонкий слой Адсорбционный Бумажная Жидкость Жидкость Лист бумаги Распределительный Ситовая (гельпроникающая) Жидкость Жидкость Колонна По размерам молекул
Разделение веществ протекает по разным механизмам в зависимости от природы сорбента и веществ анализируемой смеси.
По механизму взаимодействия вещества и сорбента различают сорбционные методы, основанные на законах распределения, и гельфильтрационные (гельпроникающие), основанные на различии размеров молекул и разделяемых веществ. ............