БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Биологический факультет кафедра генетики и биотехнологии ИССЛЕДОВАНИЕ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ
    Курсовая работа
    студентки 3 курса ШУТ М.В.
    Научный руководитель:
    
    канд. биол. наук,
    доцент ГЛУШЕН С. В. Минск 2001г. ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ..........................................................................3 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ............................................................4
    
    1.Общие принципы проточной цитометрии ..........................4
    
    2. Анализ ДНК-гистограмм ..............................................5
    
    3. Анализ параметров клеточного цикла...............................9
    
    4.Наиболее употребительные методики, используемые
    в цитометрии клеточного цикла......................................14
    
    5.Применение цитометрии в молекулярной
    клинической диагностике...............................................17 ЗАКЛЮЧЕНИЕ....................................................................22 ЛИТЕРАТУРА...........................................................23
    ВВЕДЕНИЕ
    Возможности применения методов количественной цитометрии в биологических и медицинских исследованиях очень широки. Они включают множество задач, начиная от поиска наиболее информативных морфометрических и цитоспектрофотометрических критериев кинетики ДНК в клеточном цикле и кончая многопараметрическим изучением гетерогенных популяций исследуемых объектов. Хотя эти задачи могут решаться на различных экспериментальных моделях или клиническом материале, общие принципы остаются одинаковыми как для тех, так и других объектов. В настоящее время цитометрию принято подразделять на проточную и статическую. Первый вариант цитометрии осуществляется с помощью специальных приборов - проточных цитометров и сортеров. Для статической цитометрии могут быть использованы конфокальные микроскопы, а также более простые и дешевые системы анализа изображений, смонтированные на обычных люминесцентных микроскопах. Существует много методик, которые с одинаковым успехом можно воспроизводить как с помощью проточной, так и статической цитометрии. Более того, статическая цитометрия в некоторых случаях позволяет получить более обширную информацию о клетках, причем ее производительность не намного меньше проточной. Настоящий обзор литературы посвящен применению цитометрии для оценки параметров клеточного цикла на экспериментальном и клиническом материале. Хотя в обзоре в основном приводятся сведения, касающиеся проточной цитометрии, с учетом изложенного выше они в значительной степени распространяются также и на статическую цитометрию.
    
    ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    1.Общие принципы проточной цитометрии Метод проточной цитометрии сформировался за последние 30 лет на основе отдельных опытов по подсчету числа частиц и определению их размеров. В 1965 г. появилось первое сообщение о клеточном сортере, а в 70-х годах стали выпускать приборы, способные измерять интенсивность флуоресценции при двух и более длинах волн и определять сразу несколько клеточных параметров.
    В настоящее время выпускают два основных типа приборов для проточной цитометрии: 1) простые в использовании аппараты, которые могут измерять флуоресценцию при двух и более длинах волн и светорассеяние под углом около 10? (малоугловое прямое рассеяние) и 90?; 2) большие клеточные сортеры, которые не только измеряют пять и более клеточных или ядерных параметров, но и сортируют частицы с заданным набором этих параметров. Принципы проточной цитометрии весьма просты. ............